Vết bẩn ba màu của Masson
Sử dụng dự định:
Màu sắc phân biệt của sợi collagen và sợi cơ là một công cụ chẩn đoán quan trọng trong chẩn đoán bệnh lý.
Nguyên tắc:
Phương pháp này được sửa đổi từ màu sắc Trichome của Mallory, sử dụng hỗn hợp của hai hoặc ba thuốc nhuộm anion hoặc chức năng của nó theo trình tự để nhuộm mẫu.Kết quả nhuộm có thể bị ảnh hưởng bởi trọng lượng phân tử của thuốc nhuộm anion và độ thấm của mô.
Việc chứng minh các thành phần mô khác nhau có thể được thực hiện từ việc chọn các thuốc nhuộm anion với trọng lượng phân tử và độ thấm mô khác nhau.
Phương pháps:
1. Đặt các mô trong dung dịch Bouin hoặc dung dịch Zenker, rửa trong nước máy trong đêm, sau đó khử nước và nhúng.
2. Déparafine slide trước khi rửa bằng nước khử ion hóa.
3. Đánh vẩn trong dung dịch Weigert's Iron Hematoxylin trong 5 ~ 10 phút. Rửa ngắn gọn trong nước máy.
4. Đặt mô trong 1% ethanol axit clorua. Rửa trong nước máy chạy trong vài phút.
5. Đánh vết trong Ponceau-Acid Fucshin trong 5 ~ 10 phút. Rửa sạch một thời gian ngắn trong nước phi ion hóa.
6. Đặt các slide trong dung dịch axit phosphomolybdic 1% trong 5 phút, sau đó trong dung dịch Aniline Blue trong 5 phút.
7Đặt các tấm trong axit acetic 1% trong 1 phút, sau đó khử nước trong 95% cồn trong vài lần.
8. khô nước qua 100% cồn, rõ ràng trong xylene và phủ bằng môi trường gắn.
Thông số kỹ thuật:
Nội dung |
5 chai x20ml/ bộ |
5Btlsx100ml/bộ |
5Btlsx250ml/bộ |
Các thành phần |
Weigert Iron Hematoxylin Solution A |
20ml |
100ml |
250 ml |
Hematoxylin |
Weigert Iron Hematoxylin Solution B |
20ml |
100ml |
250 ml |
Chlorua sắt |
Giải pháp Fucshin Ponceau-Acid |
20ml |
100ml |
250 ml |
Ponceau |
Phosphomolybdic acid dung dịch |
20ml |
100ml |
250 ml |
Phosphomolybdic acid |
Aniline Blue Solution |
20ml |
100ml |
250 ml |
Màu xanh anilin |
Chú ý:
1Weigert' s Iron Hematoxylin giải pháp nên được chuẩn bị bằng cách trộn một phần bằng nhau của dung dịch A và dung dịch B trước khi sử dụng.dẫn đến mất khả năng nhuộm màu.
2. để hình thành trầm tích và dẫn đến hiệu ứng nhuộm xấu.
3. các mô nên được cố định trong giải pháp Bouin's hoặc giải pháp Zenker's. nếu cố định trong 10% formaldehyde, trước tiên deparaffinise slide để nước phi ion hóa,đặt trong dung dịch Bouin qua đêm hoặc ủ ở 37°C trong 1 ~ 2 giờ, và sau đó rửa trong nước máy chảy (cho đến khi màu vàng biến mất) trước khi nhuộm màu.
4Thời gian điều trị với dung dịch axit phosphomolybdic 1% có thể được xác định dưới kính hiển vi. Điều trị có thể được ngừng khi các sợi cơ xuất hiện màu đỏ và sợi collagen màu hồng.
Dự kiếnKết quả:
Các sợi collagen, chất nhầy và sụn |
️ |
Màu xanh |
Sợi đàn hồi |
️ |
Màu nâu |
Sợi cơ, cellulose và erythrocytes |
️ |
Màu đỏ |
Hạt nhân |
️ |
Màu xanh đen |